四、臨床與安全性問題

硅油顆粒誘導(dǎo)的免疫原性尚未完全明確。許多報告表明，硅油顆粒與蛋白質(zhì)相互作用存在潛在的免疫原性風(fēng)險，其中蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和活性受到影響，使這些顆粒-蛋白質(zhì)復(fù)合物具有免疫刺激特性。這導(dǎo)致在體外和體內(nèi)免疫原性反應(yīng)增加 。其中一些免疫原性反應(yīng)似乎受到額外外部因素的影響，包括制劑組分（如表面活性劑）、裝置類型、給藥途徑和處理條件（即運輸條件），以及臨床使用——例如，注射器振搖。就硅油顆粒濃度而言，一項對小鼠的研究表明，含有高濃度硅油微滴（不含表面活性劑）的卵清蛋白制劑產(chǎn)生的免疫反應(yīng)與含鋁佐劑的卵清蛋白制劑相似。這表明意外注入患者體內(nèi)的高劑量硅油可能導(dǎo)致免疫反應(yīng)增強。其他研究使用實際藥品和由運輸條件產(chǎn)生的硅油顆粒，顯示出與硅油顆粒相關(guān)的最小炎癥反應(yīng)。使用體外和體內(nèi)免疫模型系統(tǒng)，作者未發(fā)現(xiàn)存在表面活性劑聚山梨酯 80（組合產(chǎn)品中常用的表面活性劑）時免疫原性風(fēng)險增加。Saggu 等人的研究也表明，硅油顆粒未顯著影響多種藥物、患者人群和給藥途徑的患者安全性特征，表明硅油顆粒的存在不會引起患者安全問題。玻璃體內(nèi)應(yīng)用也表明了“有癥狀的硅油顆?！钡目赡苄裕顼w蚊癥和炎癥，盡管這些表現(xiàn)并不一致且可能具有產(chǎn)品特異性——但這超出了本文的范圍。

硅油具有悠久的臨床使用歷史，并已根據(jù)現(xiàn)有數(shù)據(jù)發(fā)布了安全性評估。其毒理學(xué)特征仍存在空白，尤其是在評估其顆粒形式的影響時。這使得為硅油顆粒數(shù)量建立臨床閾值具有挑戰(zhàn)性，因為從患者安全角度進行毒理學(xué)特征和評估的是硅油顆粒中的硅油含量，而不是顆粒的數(shù)量或大小。如前所述，更復(fù)雜治 療藥物的持續(xù)開發(fā)創(chuàng)造了新的臨床場景，患者暴露于不同類型的顆粒。區(qū)分藥品中顆粒的類型將實現(xiàn)更具體的安全性評估，從而更好地了解患者實際暴露于不同顆粒及其組成的情況。

五、新興科學(xué)認識

亞可見顆粒分析是藥物開發(fā)的重要方面，該領(lǐng)域新技術(shù)正迅速涌現(xiàn)。通常，這些新興技術(shù)被用作正交表征工具，在藥典方法測量到高或變化的亞可見顆粒計數(shù)時，基于形態(tài)、折射率、密度等方面的差異來獲取特定顆粒群的額外信息。此外，許多這些儀器旨在作為開發(fā)研究的篩選工具，目標(biāo)是高通量和小樣本量分析（微升而非毫升），并非用于批放行。其中一些儀器使用微流控技術(shù)或基于不同的物理原理檢測顆粒，導(dǎo)致分析的尺寸范圍與藥典光阻法不同。因此，在將此類數(shù)據(jù)與藥典方法生成的數(shù)據(jù)進行比較時需要仔細評估。一些這些技術(shù)及其階段適用性策略的討論可見于《治 療性蛋白質(zhì)注射劑中亞可見微粒的測定》。以下簡要概述用于表征硅油顆粒的新興技術(shù)。

全息顯微鏡基于入射激光束與一小部分與粒子相互作用并被散射的激光束之間的干涉，從而產(chǎn)生全息圖。分析該全息圖可以提供大量信息，包括顆粒大小和形狀及其折射率。全息全表征能夠計數(shù)和測量約 0.5–10 μm 尺寸范圍內(nèi)的顆粒。先前的工作表明，該方法能夠區(qū)分硅油顆粒與制劑中的其他顆粒，如蛋白質(zhì)顆粒。

近年來另一個受到關(guān)注的高通量方法是背景化膜成像，該方法基于膜顯微鏡法。該方法使用 96 孔板，在樣品過濾前后對膜進行數(shù)字成像。然后通過從樣品圖像中減去背景圖像來可視化捕獲的顆粒。雖然硅油顆粒在樣品制備過程中被過濾膜去除，但捕獲的顆粒代表了非硅油顆粒群，可用于評估保留在過濾器上的亞可見顆粒群。

傳統(tǒng)的光譜方法，如拉曼或傅里葉變換紅外顯微鏡，通常用于顆粒的化學(xué)表征和鑒定。過去幾年，圖像分析的進步使得基于形態(tài)或大小進行（半）自動化顆粒分析成為可能，無論是過濾分離后還是直接在溶液中進行。

最近，基于人工智能的圖像分析工具已使用來自流式成像 等方法的圖像，改進并加速了硅油顆粒和其他顆粒類型的分類 。

表征樣品中的硅油顆粒群固然重要，但量化溶液中硅油的總量也至關(guān)重要。通常，核磁共振或電感耦合等離子體質(zhì)譜等光譜方法用于此目的，它們能夠量化低至百萬分之一級的硅油。

六、監(jiān)管視角

從監(jiān)管角度看，微粒物質(zhì)應(yīng)像所有關(guān)鍵質(zhì)量屬性一樣對待，重 點是確保過程控制和患者安全。為展示過程控制，收集有關(guān)整個開發(fā)過程中發(fā)現(xiàn)的顆粒粒徑分布和類型的歷史數(shù)據(jù)至關(guān)重要。這有助于建立產(chǎn)品的“正常范圍”，并識別顆粒的潛在來源。不同類型顆粒的安全影響可以通過計算機模擬、體外和體內(nèi)模型系統(tǒng)進行探究，但最 終只能從實際臨床結(jié)果中確定。

有意義的規(guī)格是展示過程控制和確保產(chǎn)品安全的重要工具。美國食品藥品監(jiān)督管理局期望在收集多批次數(shù)據(jù)后建立產(chǎn)品特定規(guī)格。了解典型的顆粒特征，包括存在的顆粒類型，是風(fēng)險評估以及區(qū)分產(chǎn)品質(zhì)量屬性和關(guān)鍵質(zhì)量屬性的重要組成部分。如上所述，硅油液滴可能表現(xiàn)為亞可見顆粒，改變顆粒粒徑分布，有時甚至導(dǎo)致產(chǎn)品因亞可見顆粒數(shù)量明顯增加而未能通過亞可見顆粒批放行檢驗。對于構(gòu)成亞可見顆粒群的顆粒進行表征，而不僅僅是確定顆粒粒徑分布，特別是在開發(fā)階段，是關(guān)鍵。

當(dāng)硅油顆粒是由于給藥裝置變更（例如，從小瓶改為預(yù)灌封注射器）而引入時，其存在并不表示過程失控，而是改變初級容器眾所周知的效應(yīng)。如果硅油的存在對產(chǎn)品沒有安全影響，則可以與監(jiān)管機構(gòu)討論如何處理這種情況，以及如何區(qū)分硅油顆粒與其他來源（如藥物本身）的顆粒。需要提供藥典方法之外的顆粒表征數(shù)據(jù)，以及風(fēng)險評估計劃，以及如何區(qū)分硅油顆粒增加與其他具有不同安全性特征的顆粒類型增加。臨床試驗應(yīng)設(shè)計為探究特定顆粒類型和關(guān)鍵質(zhì)量屬性的安全性。強烈建議在行業(yè)內(nèi)共享類似類型產(chǎn)品的臨床安全性特征，作為理解特定顆粒類型潛在安全風(fēng)險的途徑。

標(biāo)簽：生物制藥行業(yè)面臨的挑戰(zhàn)與策略