前言

2023年7月14日，國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）、世界衛(wèi)生組織（WHO）和糧食及農(nóng)業(yè)組織（FAO）食品添加劑聯(lián)合專(zhuān)家委員會(huì)（JECFA）聯(lián)合發(fā)布了無(wú)糖甜味劑阿斯巴甜對(duì)健康影響的評(píng)估報(bào)告。國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）援引對(duì)人類(lèi)致癌性的“有限證據(jù)”，將阿斯巴甜歸為 可能對(duì)人類(lèi)致癌之列（IARC 2B組），食品添加劑聯(lián)合專(zhuān)家委員會(huì)（JECFA）重申，阿斯巴甜每日允許攝入量為40mg/kg。

國(guó)際食品法典委員會(huì)（CAC）批準(zhǔn)阿斯巴甜可用于冷凍飲品、口香糖、糖果、焙烤食品、水產(chǎn)品、調(diào)味品、碳酸飲料等，規(guī)定Z 大使用量為0.3g/kg~10.0g/kg。我國(guó)通過(guò)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)對(duì)阿斯巴甜的使用范圍、Z 大使用量等進(jìn)行嚴(yán)格規(guī)范管理。

本文搭配了SCION（賽里安） LC6000 6430超高靈敏度二極管陣列檢測(cè)器，采用先進(jìn)的光路設(shè)計(jì)，結(jié)合小體積流通池和單色器可變狹縫，阿斯巴甜和阿力甜檢出限可達(dá)1.0mg/kg。

實(shí)驗(yàn)部分

儀器

采用包含以下模塊的SCION（賽里安）LC6000高效液相色譜儀系統(tǒng)：

集成六通道真空脫氣的SCION LC6100 四元泵

 SCION LC6210 高精度、低殘留自動(dòng)進(jìn)樣器

 SCION LC6320 立式柱溫箱

 SCION LC6430 DAD 超高靈敏二極管陣列檢測(cè)器

 液相色譜條件

▼ 表1 方法參數(shù)

試劑及標(biāo)準(zhǔn)品

乙腈溶液(HPLC級(jí))、 阿力甜標(biāo)準(zhǔn)品（編號(hào)：BWJ4683-2016）、阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品（編號(hào)：ASP:841418）

結(jié)果

示例圖譜

▲ 圖1 阿斯巴甜和阿力甜 25μg/ml示例色譜圖

▲ 圖2 阿斯巴甜和阿力甜3D紫外吸收全譜圖（190nm-230nm）

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

將阿斯巴甜和阿力甜混合標(biāo)準(zhǔn)溶液依次稀釋為5、10、25、50、100μg/ml，使用外標(biāo)法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)定量，以濃度為橫坐標(biāo)峰面積為縱坐標(biāo)作外標(biāo)工作曲線(xiàn)；阿斯巴甜和阿力甜響應(yīng)值與濃度呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，所得到的相關(guān)系數(shù)在0.9999以上，詳見(jiàn)圖3。

▲ 圖3 阿斯巴甜和阿力甜標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

樣品

稱(chēng)取5g的無(wú)糖可樂(lè),在50°C水浴上除去二氧化碳，并用水稀釋10倍，然后使用0.45μm濾膜進(jìn)行過(guò)濾，從而制備所需的分析無(wú)糖可樂(lè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)阿斯巴甜分離良好，含量為14.1μg/ml與市面上無(wú)糖可樂(lè)添加量基本一致，符合CAC食品添加劑相關(guān)規(guī)定。詳見(jiàn)圖4。

▲ 圖4 無(wú)糖可樂(lè)阿斯巴甜色譜圖

重現(xiàn)性

阿斯巴甜峰面積RSD%0.71（n=6），保留時(shí)間RSD%0.10（n=6）；阿力甜標(biāo)峰面積RSD%0.56（n=6），保留時(shí)間RSD%0.14（n=6）結(jié)果見(jiàn)表2。

▼ 表2 阿斯巴甜和阿力甜定量定性

檢出限

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) GB 5009.265-2016 阿斯巴甜和阿力甜檢出限為1.0mg/kg，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)SCION LC6430 DAD二極管陣列檢測(cè)器對(duì)阿斯巴甜和阿力甜檢出限遠(yuǎn)優(yōu)于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.265-2016，詳見(jiàn)圖5。

▲ 圖5 阿斯巴甜和阿力甜1.0mg/kg檢出限

結(jié)論

本應(yīng)用搭配了SCION LC6000 6430二極管陣列檢測(cè)器用來(lái)快速分析食品中的阿斯巴甜和阿力甜的方法，該方法配置合理、線(xiàn)性良好、靈敏度高，遠(yuǎn)優(yōu)于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.265-2016食品中阿斯巴甜和阿力甜的測(cè)定方法。