一、樣品提取 

準確稱取酸奶 2.0 g 于 50 mL 離心管中加入 15 mL 乙酸乙酯， 漩渦搖勻 2 min，4000 r/min 離心 5 min，取上清液；重復 提取一次，合并清液；40℃水浴旋蒸至近干。雞心瓶加 0.1  mol/L鹽酸 3 mL，渦動 1 min，充分溶解轉移至 15 mL離心管中； 向雞心瓶加 3 mL 正己烷，手搖一分鐘，轉移至同一離心管中； 手搖離心管 20 次，4000 r/min 離心 5 min，棄去正己烷層。 再加 0.1 mol/L 鹽酸 3 mL，渦動 1 min，合并兩次鹽酸溶液， 加 3 mL 正己烷重復除脂一次，除盡正己烷層，備用。 

二、SPE 柱凈化（Copure? MCX，60 mg/3 mL） 

活化：MCX 柱使用前依次用 3 mL 甲醇活化、3 mL 0.1  mol/L 鹽酸平衡。 

上樣和洗脫：在 MCX 固相萃取柱上加入鹽酸提取備用液，棄 去流出液；依次用 2 mL 0.1 mol/L 鹽酸、2 mL 甲醇淋洗，棄 去淋洗液；抽干小柱；用 6 mL 甲醇 -10% 氨水溶液（6:4, v/ v）洗脫，收集洗脫液（整個上樣、洗脫過程保持流速 1 mL/ min）。 

重新溶解：洗脫液于 40℃氮吹至 1 mL 以下，用水定容至 1  mL，過 0.22 μm 濾膜，供 HPLC 上樣測試。 

三、儀器條件 

設備：Waters Alliance 2695 色譜柱 ：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) 檢測器 ：Waters 2487 紫外檢測器 檢測波長：319 nm 流動相：A：乙腈 B：水 洗脫方式：梯度洗脫，見表 1 

表 1 梯度洗脫條件