1.樣品準備

提取

(1)稱取1 g均質樣品于15 mL離心管中，加入8 mL乙酸提取液 *和4 mL。

(2)振蕩4 min， 4000 rpm下離心4 min，收集上清液；

(3)下層殘留物用5 mL、5 mL 乙酸提取液重復提取兩次，合并三次提取液；作為上樣液，待凈化。

*乙酸提取液：10%乙酸溶液（用50%甲醇水溶解）

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2.SPE柱凈化——ProElut PXC 500 mg/12 mL（Cat.# 68207）

(1)活 化：依次加入6 mL甲醇，6 mL水，流出液棄去；

(2)上 樣：將上樣液加入柱中*，流出液棄去；

(3)淋 洗：依次用10 mL水，3 mL甲醇淋洗，流出液棄去；

(4)洗 脫：10 mL10%氨水（甲醇：水=3:7）溶液洗脫，收集洗脫液；

(5)重新溶解：在50 ℃下用減壓蒸餾將洗脫液濃縮近干，然后用1%乙酸重新定容至1mL，上機供HPLC分析。

分析條件

色譜柱：Spursil C18 250×4.6mm ID，5μm（Cat.#82001）

流 速：1.0 mL/min

檢測器：UV 210nm

柱 溫：30 ℃

進樣量：20 μL

流動相：50mmol/L磷酸二氫鉀(1L磷酸二氫鉀溶液需加入300uL磷酸)：乙腈(92:8)

適用于飼料中萬古霉素的測定

萬古霉素