Sievers分析儀與知名藥企禮來公司合作，在美國注射藥物協(xié)會（PDA）藥物微生物學(xué)會議上展示了用于細(xì)菌內(nèi)毒素檢測（BET，Bacterial Endotoxin Test）的重組試劑和微流控技術(shù)的研究。

該研究結(jié)果來自于真實世界的樣本數(shù)據(jù)，證明了重組試劑在現(xiàn)代微生物檢測平臺上的準(zhǔn)確性和可靠性。禮來公司全 球質(zhì)量實驗室高級總監(jiān)Jay Bolden和Sievers分析儀生命科學(xué)產(chǎn)品應(yīng)用專家Hayden Skalski在PDA微生物學(xué)會議上展示了研究成果。

圖為Jay Bolden與Hayden Skalski

在PDA微生物學(xué)會議

背景：鱟試劑（LAL）與微流控細(xì)菌內(nèi)毒素檢測中的重組級聯(lián)試劑（rCR）

越來越多的制藥公司通過采用創(chuàng)新技術(shù)來滿足不斷變化的監(jiān)管要求，同時構(gòu)建更加可持續(xù)的運營模式。內(nèi)毒素檢測正是這一轉(zhuǎn)變的典型代表，因為監(jiān)管壓力和可持續(xù)發(fā)展需求正在重塑細(xì)菌內(nèi)毒素檢測儀領(lǐng)域的格局。歐盟GMP附錄一鼓勵通過技術(shù)進(jìn)步來簡化生產(chǎn)流程，而美國藥典（USP）<86>最近發(fā)布的內(nèi)毒素檢測重組試劑則為實現(xiàn)監(jiān)管合規(guī)性和可持續(xù)發(fā)展目標(biāo)提供了重要機會。

出于這些原因，Sievers分析儀與禮來公司合作，使用Sievers? Eclipse細(xì)菌內(nèi)毒素檢測儀，對傳統(tǒng)鱟試劑（LAL）和新型重組級聯(lián)試劑（rCR）的檢測結(jié)果進(jìn)行比較研究。該儀器利用微流控技術(shù)與向心力，將傳統(tǒng)96孔板的檢測準(zhǔn)備時間縮短至原來的85%；減少高達(dá)90%的鱟試劑或重組試劑的用量；并實現(xiàn)試劑的自動化加樣。除提升效率外，該系統(tǒng)還能確保檢測結(jié)果的精確性與可靠性，幫助生產(chǎn)商同時滿足《附錄一》規(guī)范要求和可持續(xù)發(fā)展目標(biāo)，在完全符合法規(guī)要求的前提下保障患者安全。

本研究使用從真實世界樣品中獲得的數(shù)據(jù)概述了內(nèi)毒素檢測的結(jié)果，提供了兩種試劑類型之間的實際比較。

比較研究：檢測天然內(nèi)毒素（NOE）和內(nèi)毒素參考標(biāo)準(zhǔn)品（RSE）

這項研究有兩個目標(biāo)。首要目標(biāo)是評估天然內(nèi)毒素（NOE）和添加了內(nèi)毒素參考標(biāo)準(zhǔn)品（RSE）的純化水的檢測和回收率。此評估采用了兩種不同的檢測方法：傳統(tǒng)鱟試劑（LAL）和重組級聯(lián)試劑（rCR），目的是證明兩種檢測方法均能實現(xiàn)可靠的內(nèi)毒素回收。

另一個目標(biāo)是通過在Sievers Eclipse細(xì)菌內(nèi)毒素檢測儀上使用兩類試劑進(jìn)行挑戰(zhàn)性測試，以驗證這些性能指標(biāo)。這一驗證尤為關(guān)鍵，其目的不僅在于證明該系統(tǒng)適用于實際樣品檢測，同時還能帶來兩大顯著優(yōu)勢：試劑消耗量降低90%和可使用重組試劑，從而推動行業(yè)踐行更可持續(xù)的檢測方案。

樣品：12種樣本類型的rCR比較研究

在鱟試劑（LAL）和重組級聯(lián)試劑（rCR）的比較研究中使用了以下樣品：

 兩種單克隆抗體

 胰島素

 肽

 NOE（見圖1）

 組氨酸和醋酸鈉

 LRW

 純化水

 含RSE加標(biāo)的純化水

 聚山梨醇酯80

 類生物產(chǎn)品

 組件（塞子、試劑盒）

 酵母提取物

圖1：天然內(nèi)毒素（NOE）的比較

結(jié)果：LAL與rCR對比 - 性能和測試結(jié)果

下圖詳細(xì)說明了樣品和試劑的陽性產(chǎn)品對照（PPC）回收率。

圖2：樣品和試劑的回收率比較

結(jié)論：rCR在微流控平臺中的性能

這項研究表明，使用Sievers Eclipse檢測真實樣品中的細(xì)菌內(nèi)毒素和天然內(nèi)毒素時，LAL和rCR的性能相當(dāng)。根據(jù)現(xiàn)有證據(jù)可確認(rèn)：在已驗證樣本兼容性的前提下，Sievers Eclipse細(xì)菌內(nèi)毒素檢測儀能夠成功應(yīng)用重組級聯(lián)試劑進(jìn)行檢測。

通過Eclipse的向心微流控平臺實現(xiàn)的自動化，提供了當(dāng)前最為簡便的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測微流控解決方案，可顯著節(jié)省時間并減少出錯可能。這項創(chuàng)新技術(shù)的應(yīng)用使細(xì)菌內(nèi)毒素檢測流程得以優(yōu)化，同時完全符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。

優(yōu)勢包括：

 符合美國藥典USP <85>和<86>、中國藥典ChP <1143>要求

 經(jīng)驗證可與鱟試劑和重組級聯(lián)試劑rCR兼容

 減少高達(dá)90%的所需試劑量；助力可持續(xù)發(fā)展計劃

 27次移液步驟可處理21個樣本，效率更高

 符合歐盟GMP附錄一準(zhǔn)則的創(chuàng)新技術(shù)