GX液相色譜儀色譜柱在色譜分析系統(tǒng)中主要起著分離檢測(cè)物質(zhì)的作用，如同色譜系統(tǒng)的心臟，同時(shí)也是易損耗品。所以，GX液相色譜儀色譜柱的保存和再生顯得尤為重要。

GX液相色譜儀色譜柱保存

　　為了延長(zhǎng)GX液相色譜儀色譜柱的使用壽命，應(yīng)在分析柱前連接一個(gè)小體積的保護(hù)柱。保護(hù)柱是內(nèi)徑為1.0mm、2.1mm、3.2mm、4.6mm或10mm、20mm、40mm，長(zhǎng)7.5mm、10mm或20～60mm的短填充柱，通常填充和分析柱相同的填料(固定相)，可看作是分析柱的縮短形式，安裝在分析柱前。其作用是收集、阻斷來自進(jìn)樣器的機(jī)械和化學(xué)雜質(zhì)，以保護(hù)和延長(zhǎng)分析柱的使用壽命。

　　一只1cm長(zhǎng)的保護(hù)柱就能提供充分的保護(hù)作用。若選用較長(zhǎng)的保護(hù)柱，可降低污染物進(jìn)入分析柱的機(jī)會(huì)，但會(huì)引起譜帶擴(kuò)張。因此選擇保護(hù)柱的原則是在滿足分離要求的前提下，盡可能選擇對(duì)分離樣品保留低的短保護(hù)柱。

　　保護(hù)柱也可裝填和分析柱不同的填料，如較粗顆粒的硅膠(10～15um)或聚合物填料，但柱體積不宜過大，以降低柱外效應(yīng)的影響。保護(hù)柱裝填的填料較少，價(jià)格較低，其為消耗品，通?？煞治?0～100次樣品，柱壓力降呈現(xiàn)增大的趨向就是需要更換保護(hù)柱的信號(hào)?，F(xiàn)在市場(chǎng)供應(yīng)的結(jié)構(gòu)新穎可更換柱芯式設(shè)計(jì)的保護(hù)柱，由保護(hù)柱套和可更換式保護(hù)柱芯兩部分組成。

　　對(duì)硅膠基體的鍵合固定相，流動(dòng)相的pH值應(yīng)保持在2.5～7.0之間。具有極端值的流動(dòng)相會(huì)溶解硅膠，而使鍵合相流失。

　　使用水溶性流動(dòng)相時(shí)，為防止微生物繁殖引起柱阻塞，應(yīng)加入0.01%的疊氮化Na，以YZ微生物的繁殖。對(duì)不潔凈的樣品，要使用0.45um濾膜過濾或經(jīng)固相萃取器凈化后再進(jìn)樣。

　　GX液相色譜儀進(jìn)行正式分析前，應(yīng)先用10倍柱體積的流動(dòng)相沖洗色譜柱，以保持GX液相色譜儀色譜柱處于平衡狀態(tài)。當(dāng)使用乙醇、異丙醇、乙酸等黏度大的流動(dòng)相時(shí)，色譜柱的平衡時(shí)間要延長(zhǎng)，甚至要加倍。

　　對(duì)反相C18 鍵合相柱，除去柱中含有的緩沖溶液鹽類或水溶性物質(zhì)時(shí)，不應(yīng)使用純水沖洗。因?yàn)镃18鍵合相像一條長(zhǎng)鏈將硅膠黏結(jié)，當(dāng)有有機(jī)溶劑存在時(shí)，其表面被流動(dòng)相潤(rùn)濕，C18長(zhǎng)鏈完全展開，像海水中的海藻一樣。當(dāng)純水或緩沖溶液通過時(shí)，C18鍵合相與其不浸潤(rùn)，鍵合相表面會(huì)塌陷，從而將溶劑、樣品分子或無機(jī)鹽分子包合。此時(shí)僅用純水無法將包合物洗脫出，應(yīng)使用含5%有機(jī)溶劑的水溶液沖洗，才可清除無機(jī)鹽或水溶性物質(zhì)。

　　硅膠、氧化鋁或正相鍵合相柱，應(yīng)保存在流動(dòng)相中。氰基柱不能保存在純有機(jī)溶劑(如甲醇或乙腈)中，應(yīng)保留在欲使用的流動(dòng)相中;氨基柱應(yīng)該保存在乙腈中，而非流動(dòng)相，并且應(yīng)注意不可使用丙酮作流動(dòng)相。C18反相柱應(yīng)保存在純甲醇溶劑中，對(duì)填充高交聯(lián)度苯乙烯-二乙烯基苯共聚微球的非極性固定相也可用此法保存。

GX液相色譜儀色譜柱再生

　　對(duì)使用時(shí)間較長(zhǎng)、柱效逐漸下降的GX液相色譜儀色譜柱，可用下述方法進(jìn)行快速再生，以除去微量不潔雜質(zhì)在柱頭的聚積。

　　正相柱：用下述極性強(qiáng)且能互溶的有機(jī)溶劑來洗滌色譜柱，每種溶劑每次用30mL清洗，按庚烷、lv仿、乙酸乙酯、丙酮(氨基柱不用)、甲醇、5%甲醇水溶液次序沖洗(洗脫劑的極性依次遞增)，Z后再用純甲醇通過柱將水分帶出，拆下柱置于氣相色譜儀柱箱中升溫至75℃，以除去水分。另應(yīng)注意不能使用乙醇，它會(huì)使柱喪失柱效。

　　反相柱：用極性溶劑每種30mL，按以下順序清洗：5%甲醇水溶液、0.5mol/L H3PO4(或0.1mol/L EDTA鈉鹽)、5%甲醇水溶液、甲醇、甲醇-lv仿(1：1)混合液、甲醇、5%甲醇水溶液。Z后保存在甲醇溶劑中。

　　當(dāng)GX液相色譜儀色譜柱的性能變得很差時(shí)，可采用下述兩種方法，作Z后的補(bǔ)救。

　　一種方法是修補(bǔ)柱頭并同時(shí)更換不銹鋼燒結(jié)片。當(dāng)取下燒結(jié)片發(fā)現(xiàn)柱頭塌陷或填料被雜質(zhì)污染時(shí)，可挖掉0.5mm左右的固定相，再重新填充同樣的干燥固定相，用少量流動(dòng)相潤(rùn)濕，再填充干燥的固定相與柱口平齊，如此重復(fù)3～5次。再換上新的不銹鋼燒結(jié)過濾片，擰緊結(jié)頭，與高壓泵連接，用流動(dòng)相沖洗20min，若柱壓力降恢復(fù)正常，可連接GX液相色譜儀檢測(cè)器，測(cè)柱效。若柱效恢復(fù)就可繼續(xù)使用。若柱壓力降恢復(fù)正常，但柱效仍偏低，表明柱頭未填充緊密，仍有空隙，此時(shí)應(yīng)重復(fù)上述操作，直至柱壓力降恢復(fù)正常、柱效也恢復(fù)正常才可繼續(xù)使用。

　　另一種方法是倒沖色譜柱。此法適用于已修補(bǔ)過柱頭，柱壽命已達(dá)中后期的色譜柱。柱逆向使用后柱效會(huì)損失較大(約30%)，倒沖柱可檢查柱頭不銹鋼燒結(jié)片是否堵塞。若已堵塞在倒沖柱時(shí)，可觀察到柱壓力降減小，待柱壓力降恢復(fù)正常，再將GX液相色譜儀色譜柱按原方向安裝使用。