液相色譜儀色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。液相色譜通常均采用填充柱。色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相，以及色譜柱的制備和操作條件。

液相色譜儀色譜柱的安裝

　　液相色譜儀色譜柱在運輸過程中或在沒有使用時，它的兩端總是用堵頭進行密封。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時，首先移去兩端的堵頭。請注意將流動相流動的方向與柱上標(biāo)記的方向保持一致。除非出于特殊考慮，例如為了清除堵在色譜柱入口端的臟污等而需要將色譜柱反接以進行沖洗時，建議用戶在接上色譜柱時一定要遵循柱上標(biāo)記的方向。

　　由于色譜柱的連接是整個色譜操作過程的一部分，如果密封卡套過緊，或安裝不合適，或者密封卡套與色譜柱端口不匹配，都有可能導(dǎo)致溶液的泄漏。請按照下面步驟將色譜柱與密封卡套相連接，從而將色譜柱接入液相色譜儀系統(tǒng)：

　?、賒iyi次使用的管線，請依次將管線接頭和密封卡套裝在外徑1/16”的管線上。密封卡套的寬口端應(yīng)朝向管線接頭。

　　②將管線緊緊插入色譜柱的接口，向前滑動密封卡套和管線接頭，并使管線接頭的螺紋與色譜柱端口的螺紋相互銜接，然后擰緊管線接頭。如果管線為高分子材料，請轉(zhuǎn)到步驟④;如果是金屬管線，請繼續(xù)③。

　?、墼谟昧⒐芫€壓入柱端接口之后，用1/4”扳手將已擰緊的螺帽再進一步緊固。

　　④對液相色譜儀色譜柱的另一端采用上述方法進行操作。C18色譜柱中的液相是甲醇(或乙腈)的水溶液。在儲存和運輸過程中，硅膠填料可能會干涸。這時推薦使用10-20倍柱體積的純有機溶劑如甲醇、乙腈等進行沖洗以活化色譜柱。接著可用自己選擇的流動相沖洗色譜柱。流速由0.1mL/min逐漸升至所需的操作條件，直至基線穩(wěn)定為止。如果柱壓和基線波動較大，這可能是氣泡進入了色譜柱中。這時可用較高流速沖洗色譜柱2-5分鐘，例如4.6~150mm的色譜柱可采用流速2mL/min。

液相色譜儀色譜柱使用

　　液相色譜儀色譜柱是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進行先分離，而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。

　　現(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較，具有GX、快速、靈敏等特點。液相色譜儀色譜柱對高沸點、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑并以實現(xiàn)分離。應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等部門。在選擇液相色譜儀色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質(zhì)，他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。

　　1、樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在1**%酸性水溶液條件下檢測，即要選擇承受1**%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱。

　　2、如果樣品極性太強，或酸性太強;可以選擇成都摩爾提供的C18色譜柱，液相色譜儀色譜柱(親水色譜)，也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長，對流動相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實驗，另外離子對試劑很難洗下來，基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)。

　　3、若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì)，且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等)，他們都會減少堿性化合物的拖尾，一般會選擇中性或偏堿的條件下做，因為這樣可增加堿性樣品的保留。

　　4、如果堿性化合物的極性太強，或堿性太強;液相色譜儀色譜柱可以選擇寬pH的C18液相色譜儀色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點是方法開發(fā)簡單，缺點是目前實現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少，價格也高)或者選用液相色譜儀色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用，這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。