小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒實驗使用說明書

　　BS-2262 小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒

　　一、試劑盒組成

　　固相載體：預先包被小鼠BMPs捕獲抗體的96孔微孔板(每孔0.1ml)

　　酶標記物：HRP標記的小鼠BMPs檢測抗體(120μl)

　　底物系統(tǒng)：TMB顯色液(6ml)+終止液(6ml)

　　標準品：6管凍干標準品(濃度范圍156.25-5000 pg/ml)

　　輔助試劑：洗滌緩沖液(20×濃縮液)、樣本稀釋液、封板膜

　　二、樣本處理

　　血清/血漿：

　　室溫凝固10-20分鐘，3000rpm離心10分鐘取上清

　　避免溶血(血漿需EDTA/檸檬酸鹽抗凝)

　　細胞上清：

　　3000rpm離心10分鐘去除顆粒

　　組織勻漿：

　　生理鹽水搗碎后3000rpm離心10分鐘

　　保存條件：

　　2-8℃保存≤24小時，長期保存需分裝凍存于-20℃

　　三、操作步驟

　　包被：

　　4℃過夜孵育(抗原濃度需優(yōu)化)

　　洗滌：

　　棄孔內(nèi)溶液，3次洗滌(每次3分鐘)

　　加樣：

　　樣本/標準品50μl+HRP抗體50μl，37℃孵育1小時

　　顯色：

　　TMB底物50μl，37℃避光10-30分鐘

　　終止：

　　加終止液50μl，15分鐘內(nèi)測OD值

　　四、結(jié)果計算

　　標準曲線：

　　以標準品濃度為橫坐標，OD值為縱坐標繪制曲線

　　樣本濃度：

　　樣本OD值代入標準曲線方程，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)

　　定量范圍：

　　156.25-5000 pg/ml(靈敏度<10 pg/ml)

　　五、注意事項

　　試劑保存：

　　試劑盒2-8℃保存，有效期6個月

　　洗滌液結(jié)晶需水浴溶解后使用

　　操作規(guī)范：

　　避免交叉污染(加樣槍需校準)

　　終止液含強酸，接觸后立即沖洗

　　實驗限制：

　　僅用于科研，不得用于臨床診斷

　　樣本值超范圍需重新稀釋測定

　　注：供科研使用，以上資料供參考，不作為實驗依據(jù)，具體請咨詢技術老師或品牌商。

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