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2025-01-21 09:33:29熒光生物攝像顯微鏡: 熒光生物攝像顯微鏡是一種集熒光觀察與攝像功能于一體的顯微鏡，廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究。它通過特定波長(zhǎng)的光源激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)，利用高靈敏度的攝像系統(tǒng)捕捉熒光信號(hào)，實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞、組織等生物樣本的精細(xì)觀察。該顯微鏡具有高分辨率、高靈敏度、低光損耗等特點(diǎn)，能夠?qū)崟r(shí)記錄生物樣本的動(dòng)態(tài)變化，為生命科學(xué)領(lǐng)域的研究提供有力支持。此外，它還配備了多種濾光片和物鏡，滿足不同研究需求。

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熒光生物攝像顯微鏡問答

2025-02-01 12:10:11生物如何調(diào)節(jié)顯微鏡標(biāo)本: 生物如何調(diào)節(jié)顯微鏡標(biāo)本在顯微鏡觀察過程中，生物學(xué)家和研究人員必須通過精確的調(diào)節(jié)技巧，確保標(biāo)本能被清晰地呈現(xiàn)在顯微鏡下。這一過程不僅涉及到顯微鏡本身的調(diào)節(jié)，還包括對(duì)生物標(biāo)本的適當(dāng)準(zhǔn)備和操作。本文將探討在顯微鏡觀察中，生物如何通過不同方式調(diào)節(jié)標(biāo)本，使其呈現(xiàn)出佳的觀察效果，從而為研究人員提供更為精確的數(shù)據(jù)。顯微鏡標(biāo)本的調(diào)節(jié)開始于標(biāo)本的制備。不同類型的生物標(biāo)本（如植物細(xì)胞、動(dòng)物組織或微生物）通常需要進(jìn)行特定的切片或染色處理，以便在顯微鏡下能夠清晰顯示。對(duì)于植物標(biāo)本，通常會(huì)進(jìn)行脫水和固定，以便保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)不被破壞。而動(dòng)物標(biāo)本常常需要更細(xì)致的處理，如冷凍切片或染色，以便區(qū)分不同類型的細(xì)胞。通過這些精細(xì)的制備過程，研究人員能夠?yàn)轱@微鏡觀察奠定良好的基礎(chǔ)。在調(diào)節(jié)顯微鏡時(shí)，生物學(xué)家會(huì)根據(jù)需要選擇合適的鏡頭和放大倍數(shù)。顯微鏡的鏡頭調(diào)節(jié)功能可以幫助他們選擇佳的觀察角度和焦距，從而獲得佳的圖像分辨率。在高倍鏡頭下，細(xì)胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)如細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)等會(huì)更加清晰，但這也要求標(biāo)本的切片必須足夠薄，才能讓光線有效穿透。適當(dāng)?shù)墓庹蘸蛯?duì)比度調(diào)節(jié)也是顯微鏡操作中不可忽視的環(huán)節(jié)。不同的標(biāo)本可能需要不同類型的光源（如反射光或透射光），以便佳地顯示其結(jié)構(gòu)特征。標(biāo)本的調(diào)整還包括標(biāo)本在顯微鏡平臺(tái)上的位置微調(diào)。微調(diào)旋鈕可以精細(xì)調(diào)整焦距，確保標(biāo)本的細(xì)節(jié)完全清晰。生物學(xué)家通過不斷微調(diào)標(biāo)本的位置，能夠逐步揭示更多細(xì)微的生物結(jié)構(gòu)，從而提供更多有價(jià)值的信息。生物調(diào)節(jié)顯微鏡標(biāo)本的過程是一個(gè)細(xì)致而專業(yè)的工作，涉及標(biāo)本準(zhǔn)備、鏡頭選擇、光照調(diào)節(jié)及位置微調(diào)等多個(gè)方面。通過這些精確的操作，研究人員能夠從顯微鏡下獲取豐富的生物信息，為科學(xué)研究提供堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。在顯微鏡技術(shù)的不斷進(jìn)步和精細(xì)操作的支持下，我們對(duì)生命科學(xué)的探索將更加深入和精確。

2025-02-01 12:10:13有沒有顯微鏡看不到的生物: 有沒有顯微鏡看不到的生物？在現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)日益發(fā)展的今天，顯微鏡被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域，幫助人們觀察到極為微小的生物體?？茖W(xué)家們常常會(huì)遇到這樣一個(gè)問題：即使借助了先進(jìn)的顯微鏡技術(shù)，某些生物依然無(wú)法被直接觀測(cè)到。這引發(fā)了一個(gè)深刻的問題：有沒有顯微鏡看不到的生物？本文將從多個(gè)角度探討這一話題，分析顯微鏡的局限性以及存在于顯微鏡下不可見的微觀生物。顯微鏡的局限性顯微鏡是我們觀察細(xì)胞、微生物以及其他微小生物的主要工具，尤其是光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡。顯微鏡的分辨率有限，能夠觀察到的小物體尺寸受到物理原理的限制。一般來(lái)說(shuō)，光學(xué)顯微鏡的分辨率為0.2微米，這意味著比這個(gè)尺寸小的生物體就無(wú)法通過光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。盡管電子顯微鏡的分辨率更高，可以觀察到納米級(jí)別的物體，但這依然無(wú)法捕捉到某些極為微小的生命形態(tài)。量子級(jí)別的微生物：無(wú)法被觀察到的存在科學(xué)家們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，存在一些比目前顯微鏡技術(shù)能夠觀察到的尺寸還要微小的生命形態(tài)。例如，某些量子級(jí)別的微生物或細(xì)胞，其大小甚至低于單個(gè)分子，遠(yuǎn)小于當(dāng)前任何儀器能夠識(shí)別的范圍?？茖W(xué)家們對(duì)一些虛擬生命形式的猜測(cè)也表明，存在一些可能以量子力學(xué)為基礎(chǔ)運(yùn)作的生物體，可能完全超出了我們現(xiàn)有技術(shù)的理解和捕捉能力。非傳統(tǒng)生命形式：暗物質(zhì)中的生物假設(shè) 除了物理尺寸的問題，科學(xué)界對(duì)于生命形式的定義也在不斷發(fā)展。近年來(lái)，一些科學(xué)家提出了“暗生物”的概念，即存在于暗物質(zhì)或暗能量中的生物體。由于暗物質(zhì)和暗能量目前無(wú)法通過傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡探測(cè)，科學(xué)家們對(duì)這些假設(shè)生命體的研究還處于理論階段。這些生物可能具備不同于我們已知的物質(zhì)和能量特性，因此無(wú)法被現(xiàn)有的顯微鏡技術(shù)探測(cè)到。總結(jié)：顯微鏡下的盲點(diǎn)與未來(lái)科學(xué)的可能性顯微鏡無(wú)疑是生物學(xué)研究的一個(gè)強(qiáng)大工具，但它也有著不可忽視的局限性，尤其是在分辨率和技術(shù)范疇上。除了尺寸限制，生命的多樣性可能超出了我們傳統(tǒng)理解的范疇。隨著科技的不斷進(jìn)步，未來(lái)可能會(huì)出現(xiàn)更先進(jìn)的探測(cè)技術(shù)，幫助我們發(fā)現(xiàn)那些無(wú)法通過顯微鏡觀察到的生物。這也促使我們不斷探索生命的邊界，不僅限于顯微鏡下的微觀世界。

2023-05-08 19:13:14明美LED熒光光源助力顯微鏡熒光升級(jí): 明美LED熒光光源助力顯微鏡熒光升級(jí)熒光顯微鏡具有特異性強(qiáng)、檢出率高等優(yōu)勢(shì)，因此在各種科研和醫(yī)學(xué)檢查應(yīng)用中使用廣泛，傳統(tǒng)熒光顯微鏡因?yàn)楣療艄庠聪拗?，有比較多使用難點(diǎn)，明美針對(duì)這些問題，投入大量人力和資金，研發(fā)出了一系列LED熒光光源，助力顯微鏡熒光升級(jí)和傳統(tǒng)熒光顯微鏡升級(jí)LED熒光顯微鏡，取得市場(chǎng)廣泛認(rèn)可。熒光顯微鏡的常用光源通常都是白光光源，而熒光光源有高壓汞燈，氙燈，金屬鹵素?zé)艉蚅ED白光光源以及LED單波長(zhǎng)光源，光源間各有優(yōu)劣勢(shì)，近期，北京用戶需要替換汞燈光源，因?yàn)楣療魤勖?，需預(yù)熱，操作繁瑣，明美北京區(qū)域工程師提供了四通道的LED熒光光源MG-120，壽命長(zhǎng)，即開即關(guān)，操作簡(jiǎn)單，解決的老師的使用煩惱熒光光源MG-120采用四通道獨(dú)立控制，可選BGUR等不同通道配置，壽命長(zhǎng)，衰減慢，通常不需要更換燈泡及校準(zhǔn)，可以即開即用；控制方便，外部配備有控制器，能進(jìn)行特定波長(zhǎng)開關(guān)和亮度記憶，減少熒光串色及熒光淬滅。此次，用戶是搭配奧林巴斯倒置顯微鏡IX73，該熒光光源已做測(cè)試，可適配各熒光顯微鏡如果您對(duì)熒光光源感興趣或存在疑問，歡迎與我們聯(lián)系，我們將竭誠(chéng)為您服務(wù)！來(lái)源：https://www.mshot.com/article/1738.html

2022-07-11 17:41:09廣東顯微鏡廠家，熒光模塊設(shè)計(jì)升級(jí)顯微鏡熒光功能: 熒光顯微鏡常與免疫組織化學(xué)和切片技術(shù)相互結(jié)合應(yīng)用于科研、檢驗(yàn)等多個(gè)領(lǐng)域，比如某一些樣品在常規(guī)光學(xué)顯微鏡下（明場(chǎng)下）無(wú)法被有效的觀察，再比如某種病原標(biāo)記物已做了標(biāo)識(shí)，但在顯微鏡下仍然難以辨識(shí)。而熒光標(biāo)識(shí)只在特定波長(zhǎng)的光源激發(fā)下才會(huì)發(fā)光，而且發(fā)出的光也具有特定的波長(zhǎng)。（廣東顯微鏡廠家-廣州市明慧科技顯微鏡）而激光具有單一的波長(zhǎng)，高準(zhǔn)確性等特點(diǎn)，對(duì)激發(fā)樣品有更好的選擇性，也更容易濾除激發(fā)光對(duì)熒光的干擾，因此一般熒光顯微鏡都選用激光作為激發(fā)光源，可以得到較好的成像質(zhì)量。這就有了顯微鏡熒光模塊的出現(xiàn)，顯微鏡集成熒光模塊的應(yīng)用是多方面的，作為正置顯微鏡、倒置顯微鏡、體視顯微鏡的通用型熒光模塊，標(biāo)配紫外、藍(lán)色、綠色等激發(fā)光組，通過滑塊/拉桿/旋鈕/旋鈕輕松切換激發(fā)光進(jìn)行熒光或明場(chǎng)觀察，廣泛應(yīng)用于呼吸道疾病、生殖道疾病、結(jié)核桿菌、自身免疫性疾病等領(lǐng)域的熒光檢測(cè)。（廣東顯微鏡廠家-廣州市明慧科技顯微鏡）熒光模塊設(shè)計(jì)升級(jí)顯微鏡熒光功能特點(diǎn)：LED即開即用，開機(jī)無(wú)須預(yù)熱；使用壽命長(zhǎng)；大功率LED熒光光源，使用壽命長(zhǎng)，無(wú)需更換燈泡，人工維護(hù)成本低；通過電源適配器實(shí)時(shí)顯示通道和亮度情況；多個(gè)高效熒光波段可供選擇，可用于不同領(lǐng)域的熒光檢測(cè)；雙光路熒光集成模塊化設(shè)計(jì)產(chǎn)品。轉(zhuǎn)盤切換4孔位熒光通道，聯(lián)動(dòng)LED照明激發(fā);卡口及濾光片均采用大口徑，保證激發(fā)光更均勻，視野更光寬，成像更清晰；滿足大部分科研要求，支持特殊波段需求定制；滿足國(guó)內(nèi)外大部分品牌顯微鏡定制，輕松為普通顯微鏡實(shí)現(xiàn)熒光觀察一大功能。熒光模塊設(shè)計(jì)升級(jí)顯微鏡熒光功能，基于外形精簡(jiǎn)、操作安裝簡(jiǎn)便的設(shè)計(jì)理念，將驅(qū)動(dòng)電源、聚光光路及熒光濾光組整合為一體，有單色熒光、雙色熒光及多色熒光等多種配置方案可選，支持特殊波段需求定制，實(shí)現(xiàn)熒光、明場(chǎng)切換觀察，優(yōu)于汞燈的激發(fā)光強(qiáng)度，為弱熒光樣品觀測(cè)實(shí)現(xiàn)更為清晰、明亮的熒光成像。顯微鏡熒光模塊能夠滿足大部分的熒光科研實(shí)驗(yàn)需求，輕松結(jié)合不同品牌的顯微鏡，無(wú)需改變顯微鏡原有的光學(xué)系統(tǒng)，支持特殊波段需求定制，給普通的顯微鏡“一鍵”升級(jí)熒光。（廣東顯微鏡廠家-廣州市明慧科技顯微鏡）

2022-09-21 10:34:10熒光觀察用什么顯微鏡？: 一、熒光基礎(chǔ)知識(shí)在顯微成像中，熒光指的是一種光致發(fā)光現(xiàn)象，某些分子能吸收特定波長(zhǎng)的光線，然后再發(fā)射出其他波長(zhǎng)的光線的物理現(xiàn)象，這種分子一般稱為熒光團(tuán)。通常情況下，由于斯托克斯位移，熒光團(tuán)的激發(fā)峰值和發(fā)射光譜之間存在差值，發(fā)射光線能量低于吸收光線，波長(zhǎng)比激發(fā)光更長(zhǎng)。熒光現(xiàn)象有兩種：自發(fā)熒光與繼發(fā)熒光。自發(fā)熒光也稱固有熒光，是指經(jīng)照射后就能發(fā)出熒光；繼發(fā)熒光也稱二次熒光，物質(zhì)經(jīng)照射后不能或只能部分發(fā)生微弱熒光，需先用熒光染料標(biāo)記處理，再經(jīng)照射才能發(fā)生熒光。目前在熒光顯微技術(shù)中，主要利用的是繼發(fā)熒光現(xiàn)象。念珠藻葉綠體的自發(fā)熒光，明美MF52-N拍攝熒光產(chǎn)生包含激發(fā)和發(fā)射兩個(gè)過程，在熒光顯微技術(shù)中具體體現(xiàn)為以下幾個(gè)關(guān)鍵部件：（1）激發(fā)光源：主要包含以下兩個(gè)指標(biāo)? 光源光譜覆蓋發(fā)射光譜：熒光團(tuán)在特定波段范圍才能被大部分激發(fā)，因此激發(fā)光源的光譜范圍要能匹配所觀察樣本中的熒光團(tuán)激發(fā)特征。? 發(fā)射光譜波段的強(qiáng)度：熒光信號(hào)一般較弱，需要使用較高亮度的激發(fā)光以產(chǎn)生較強(qiáng)信號(hào)的發(fā)射熒光信號(hào)。（明美-四通道LED光源MG120，寬光譜 + 高光功）（2）激發(fā)塊：用于形成特異性激發(fā)/發(fā)射的一組濾光片，一般包含以下三個(gè)? 激發(fā)濾光片EX：濾過光源中特定波段的光，用以激發(fā)樣本中特定染料? 發(fā)射濾光片EM：允許熒光團(tuán)發(fā)射的特定波段的光通過? 二向分色鏡DM：反射激發(fā)波段的光，透過發(fā)射波段的光。透射熒光顯微鏡沒有這個(gè)濾光片，但目前主流都是落射熒光顯微鏡，會(huì)有二向分光鏡。（明美可定制適配四家品牌，不同波段需求的激發(fā)塊）二、熒光顯微成像的應(yīng)用熒光顯微鏡利用自發(fā)熒光或繼發(fā)熒光現(xiàn)象，廣泛用于生物（醫(yī)學(xué)）、礦物、材料科學(xué)等領(lǐng)域的顯微熒光觀測(cè)。①在生物學(xué)領(lǐng)域，主要借助熒光染料標(biāo)記，可準(zhǔn)確和詳細(xì)地識(shí)別細(xì)胞和亞微觀細(xì)胞成分。②在礦物學(xué)領(lǐng)域，通常用于研究有自發(fā)熒光特性的物質(zhì)，如石油、煤炭、氧化石墨烯等礦物。③在材料科學(xué)，可用于紡織工業(yè)或造紙業(yè)來(lái)分析基于纖維的材料，包括紡織品和紙張，在半導(dǎo)體領(lǐng)域，也可用來(lái)觀測(cè)具有熒光特性的材料如磁珠等。明美MF31-LED熒光顯微鏡觀察SBS改性瀝青（MF43-N拍攝的磁珠熒光圖片）熒光顯微技術(shù)在生物學(xué)領(lǐng)域中應(yīng)用是廣泛也是復(fù)雜的，主要是對(duì)細(xì)菌、細(xì)胞、組織或小型生物（如斑馬魚等模式生物）進(jìn)行標(biāo)記成像，它的微觀層面都是通過熒光染料對(duì)分子層面進(jìn)行標(biāo)記。從熒光染料的選擇看，通常需要考慮幾個(gè)因素，一是熒光染料標(biāo)記的位置，二是該染料對(duì)應(yīng)的激發(fā)特征，包括吸收光譜特征和發(fā)射光譜特征。借助熒光染料，熒光顯微技術(shù)不只局限于蛋白質(zhì)，它還可以對(duì)核酸、聚糖進(jìn)行染色，甚至鈣離子等非生物物質(zhì)也可以檢測(cè)。以下根據(jù)染料結(jié)合的位置列舉了一些常見的熒光染料及應(yīng)用范圍：FITC熒光染色，MF52-N拍攝（1）免疫熒光（IF）：主要標(biāo)記的是蛋白質(zhì)。免疫熒光技術(shù)利用抗體可以和相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的特性，主要有兩種方式：一是利用內(nèi)源熒光信號(hào)，即通過克隆技術(shù)用遺傳學(xué)方法將熒光蛋白與目的蛋白相連，如GFP等；二是利用熒光標(biāo)記的抗體與目的蛋白特異性結(jié)合。? FITC（異硫氰酸熒光素）：是一種有機(jī)熒光染料，495/517 nm為該染料激發(fā)/發(fā)射峰值，可以和蛋白質(zhì)上的基團(tuán)結(jié)合，主要用于免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)中。? TRITC（四甲基羅丹明-5(6)-異硫氰酸）：屬于羅丹明家族的衍生物，550/573 nm為該染料激發(fā)/發(fā)射峰值，可與蛋白質(zhì)結(jié)合。? 花箐染料（cy3、cy3.5、cy5、cy5.5、cy7等系列）：非特異性吸附少，消光系數(shù)高，熒光量子產(chǎn)率高，從而讓標(biāo)記顯影時(shí)背景弱，信號(hào)強(qiáng)。除細(xì)胞顯影外，它們也常用于生物篩選、蛋白免疫印跡、生物醫(yī)學(xué)顯影、小動(dòng)物體內(nèi)成像等。? Alexa Fluor系列：屬于帶負(fù)電荷且親水的熒光染料系列，是不同基礎(chǔ)熒光物質(zhì)的磺化形式。這些產(chǎn)品標(biāo)識(shí)涵蓋了對(duì)應(yīng)的激發(fā)波長(zhǎng)，相比于FITC等染料，具有更好的穩(wěn)定性和熒光亮度。DAPI熒光染色，MF52-N拍攝（2）DNA染色：主要標(biāo)記核酸。同蛋白質(zhì)一樣，對(duì)核酸進(jìn)行標(biāo)記與研究同樣有重要意義，如對(duì)細(xì)胞核（主要成分為核酸）進(jìn)行染色標(biāo)記可以判斷細(xì)胞的數(shù)量和位置。? DAPI（4',6-二脒基-2-苯基吲哚）：當(dāng)DAPI與雙股DNA結(jié)合時(shí)，在358nm處有一個(gè)吸收峰值，在461nm處有一個(gè)發(fā)射峰值，其發(fā)射光的波長(zhǎng)范圍含蓋了藍(lán)色至青綠色。DAPI也可與RNA結(jié)合，但產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度不及與DNA結(jié)合的結(jié)果。DAPI可以透過完整的細(xì)胞膜，因此被廣泛用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色。? Hoechst（33258、33342、34580）：這三種染料都可在350nm左右的紫外光激發(fā)，在461nm處發(fā)出藍(lán)靛色熒光。與DAPI類似，Hoechst可透過完整細(xì)胞膜，被廣泛用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞染色。? PI（碘化丙啶）：是一種不能透過細(xì)胞膜的DNA染色劑。與核酸結(jié)合后，激發(fā)波長(zhǎng)為538 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為617 nm。由于該染色劑無(wú)法進(jìn)入完整的細(xì)胞中，因此該染色劑常用于區(qū)分細(xì)胞群中的活細(xì)胞和死細(xì)胞。 Fura2鈣離子探針做的研究圖片，引自公開文獻(xiàn)Front. Neural Circuits 11:11. doi: 10.3389/fncir.2017.00011（3）離子成像：研究細(xì)胞中各種離子的流動(dòng)與分布對(duì)細(xì)胞活動(dòng)的深入理解有重要作用。通過各種離子指示劑，如鈣離子、鈉離子、鎂離子、鋅離子等指示劑與離子結(jié)合形成熒光團(tuán)，利用光譜特征檢測(cè)對(duì)應(yīng)離子的分布狀態(tài)。三、熒光顯微成像的挑戰(zhàn)應(yīng)用熒光顯微技術(shù)進(jìn)行成像的過程中，不僅要考慮成像的質(zhì)量，包括分辨率、對(duì)比度、熒光信號(hào)強(qiáng)弱、背景光、多通道成像等，還要考慮熒光染料、光照等對(duì)樣本的影響，比如熒光染料毒性、光毒性、光漂白等。以下列出了熒光顯微技術(shù)應(yīng)用中的常見挑戰(zhàn)與應(yīng)對(duì)方法：汞燈需搭配帶計(jì)時(shí)器的復(fù)雜控制箱來(lái)使用（1）激發(fā)光源選擇和使用。傳統(tǒng)熒光成像使用的是高壓汞燈，具有特異性的光譜特征和較高的光強(qiáng)，但使用有很多麻煩，首先需要預(yù)熱，然后光強(qiáng)靠ND濾鏡調(diào)節(jié)，壽命較短可能就200小時(shí)，在壽命用完前還會(huì)有光強(qiáng)衰減問題，需要調(diào)整ND濾鏡，替換燈泡后需要重新校中。目前很多應(yīng)用都用LED熒光光源取代汞燈作為熒光光源，如寬光譜大功率LED熒光光源MG-100，壽命長(zhǎng)單個(gè)可以頂50個(gè)汞燈，光強(qiáng)更穩(wěn)定可控，并且可以即開即用，省事省心。明美可定制適配四家品牌的濾光片組（2）濾光片質(zhì)量和匹配度。激發(fā)塊中的濾光片質(zhì)量會(huì)影響激發(fā)光和發(fā)射光的透過率，影響熒光效率并帶來(lái)雜散光和背景噪聲問題。同時(shí)，濾光片的參數(shù)能否匹配染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰，也會(huì)對(duì)熒光效果產(chǎn)生重大影響。對(duì)于簡(jiǎn)易熒光需求，明美建議使用數(shù)顯熒光模塊，整合光源和BGU等常用激發(fā)塊，可以為四家品牌顯微鏡升級(jí)熒光觀察，簡(jiǎn)單易用效果好。對(duì)于專業(yè)熒光需求，明美提供匹配四家品牌主流熒光顯微鏡的激發(fā)盒和濾光片組，可按需定制不同濾光片組合，如鈣離子Fura2探針需要用U激發(fā)G發(fā)射，一般的U激發(fā)B發(fā)射濾光片組并不適合。（MF43-N+MC50-S拍攝的小鼠腦片熒光圖像）（3）光毒性與熒光染料毒性：在生物學(xué)領(lǐng)域的熒光成像中，需考慮光毒性與熒光染料毒性對(duì)樣本的影響，如細(xì)胞內(nèi)的有機(jī)分子在與氧反應(yīng)時(shí)吸收光發(fā)生分解并產(chǎn)生自由基，部分熒光染料本身也能產(chǎn)生自由基，這是引起細(xì)胞等生物樣本損傷的主要來(lái)源。通常的應(yīng)對(duì)思路是：①使用具有較低能量（波長(zhǎng)較長(zhǎng)）激發(fā)光譜的熒光染料；②盡可能低的光強(qiáng)和盡可能短的激發(fā)時(shí)間，需要在成像質(zhì)量與樣本健康之間保持平衡；③降低幀速率，尤其在長(zhǎng)時(shí)間的熒光成像中，這種情況需要提高相機(jī)的靈敏度，保證捕獲微弱的熒光信號(hào)。（單通道熒光拍攝，經(jīng)軟件合成多色熒光圖像）（4）多色熒光成像：在生物學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用較多，尤其是在對(duì)活細(xì)胞標(biāo)記成像時(shí)，需同時(shí)對(duì)多種物質(zhì)進(jìn)行標(biāo)記，并在一個(gè)圖像中顯示，而大多數(shù)熒光染料具有寬發(fā)射光譜，在使用多種染料標(biāo)記時(shí)會(huì)出現(xiàn)熒光光譜重疊現(xiàn)象。對(duì)于多色熒光成像，有兩種應(yīng)對(duì)思路，一是針對(duì)每種染料使用對(duì)應(yīng)的單通道窄帶濾光片，后通過軟件進(jìn)行合成，這種方式對(duì)成像速度及軟件圖像處理提出較高要求；二是使用寬光譜光源同時(shí)激發(fā)，選用雙通濾光片或多通濾光片，這種濾光片的的特點(diǎn)是允許兩種或以上波段熒光信號(hào)通過，可實(shí)現(xiàn)一組濾光片同時(shí)觀察兩種或以上熒光染料，這種方式要求相鄰的發(fā)射光譜范圍沒有重疊，所得到的熒光信號(hào)之間能較好的被區(qū)分。（雙通濾光片熒光拍攝，鏡下可同時(shí)觀察到B\G兩種熒光信號(hào)）來(lái)源：https://www.mshot.com/article/1527.html