溶質(zhì)在電場(chǎng)移動(dòng)中移動(dòng)速度不同而分離的方法,叫做電泳分離,溶質(zhì)必須帶電,它于表面吸附離子而帶電或者它本身就是離子。因?yàn)槠鋷щ娦再|(zhì)及其顆粒大小和形狀不同,不同的物質(zhì)在一定的電場(chǎng)中它們的移動(dòng)方向和移動(dòng)速度也各有差異,所以可以分離出它們。它們所帶電荷的種類決定了物質(zhì)顆粒在電場(chǎng)中的移動(dòng)方向。凈電荷為零的顆粒在電場(chǎng)中不移動(dòng),帶負(fù)電荷的顆粒則向陽(yáng)極移動(dòng),帶正電荷的顆粒向電場(chǎng)的陰極移動(dòng)。
影響電泳分離的主要因素
顆粒在電場(chǎng)中的移動(dòng)速度由其本身所帶的凈電荷量來(lái)決定,同時(shí)顆粒形狀和顆粒大小也是其的影響因素。除此以外電場(chǎng)強(qiáng)度、溶液pH、離子強(qiáng)度、及支持體的特性和溫度等外界條件也會(huì)對(duì)顆粒在電場(chǎng)中的移動(dòng)速度產(chǎn)生影響。

1.電滲
在電場(chǎng)中,溶液對(duì)于固體支持物的相對(duì)移動(dòng)稱為電滲
2.支持介質(zhì)的篩孔
分離生物大分子的電泳遷移速度明顯的受到支持介質(zhì)的篩孔大小的影響。
3.溫度
電泳時(shí)電流通過(guò)支持介質(zhì)會(huì)產(chǎn)生熱量。
4.電場(chǎng)強(qiáng)度
每厘米距離的電壓降即是電場(chǎng)強(qiáng)度。電場(chǎng)強(qiáng)度對(duì)顆粒的泳動(dòng)速度起著十分重要的作用。電場(chǎng)強(qiáng)度越高,帶電顆粒的泳動(dòng)速度越快。根據(jù)電場(chǎng)強(qiáng)度的大小可將電泳分為高壓電泳和常壓電泳。常壓電泳的電場(chǎng)強(qiáng)度一般為2~10V/cm,電壓為100~500V,電泳時(shí)間從幾十分鐘到幾十小時(shí),多用于帶電荷的大分子物質(zhì)的分離;高壓電泳的電場(chǎng)強(qiáng)度為20~200V/cm,電壓大于500V,電泳時(shí)間從幾分鐘到幾小時(shí),多用于帶電荷的小分子物質(zhì)的分離。
5.溶液的pH
溶液中顆粒分子的解離程度取決于溶液的pH,也就是說(shuō)顆粒分子所帶凈電荷的多少取決于溶液的pH。對(duì)于兩性電解質(zhì)來(lái)說(shuō)不僅顆粒分子所帶電荷的種類取決于溶液的pH,而且凈電荷的數(shù)量也由溶液的pH來(lái)決定。溶液的pH等于某溶質(zhì)的等電點(diǎn)時(shí),其凈電荷為零,泳動(dòng)速度也等于零,溶液的pH離其等電點(diǎn)越遠(yuǎn),顆粒所帶凈電荷越多,泳動(dòng)速度越快,溶液的pH離其等電點(diǎn)越近,顆粒所帶凈電荷越少,泳動(dòng)速度越慢。所以應(yīng)該在適當(dāng)?shù)臄?shù)值上選擇電泳時(shí)溶液的pH,并且需采用緩沖液維持pH恒定。
6.溶液的離子強(qiáng)度
溶液的離子強(qiáng)度越高,顆粒的泳動(dòng)速度越慢。
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