聚合酶鏈式反應是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的Zda特點，是能將微量的DNA大幅增加。

PCR的反應動力學

DNA擴增量隨著PCR的三個反應步驟的重復循環(huán)進行而呈指數(shù)級增長。實際反應初期，靶序列DNA片段呈指數(shù)級增加，當PCR產(chǎn)物的逐漸積累時，被擴增的DNA片段不再呈指數(shù)增加，此時進入線性增長期或靜止期，使得平均效率達不到理論值。

循環(huán)參數(shù)

預變性

PCR能否成功至關重要的因素為模板DNA是否完全變性與PCR酶是否完全激活。建議參考試劑說明書來決定加熱時間，通常未修飾的Taq酶激活時間為2min。

變性步驟

通常溫度為95℃，使各種靶DNA序列完全變性所需的時間大概為半分鐘，可能的情況下可以縮短該步驟時間。若變性時間過長，會對酶活性損害，若變性時間過短，則靶序列變性不徹底，可能導致擴增失敗。

引物退火

需要從多方面來決定退火溫度，通常是以引物的Tm值為參考，按照擴增的長度對退火溫度進行適當?shù)南抡{。之后在此次實驗基礎上做出預估。PCR的特異性受到退火溫度的影響非常大。

引物延伸

引物延伸通常在72℃（Taq酶Z適溫度）下進行。若退火溫度較高并且擴增長度較短，那么可以省去本步驟。

擴增片段長短決定了延伸時間，通常推薦在1000bp以上，含Pfu及其衍生物的衍生設定為1min/kbp。

循環(huán)數(shù)

大多數(shù)PCR包括25-35循環(huán)，若過多容易有非特異擴增產(chǎn)生。

Z后延伸

在Z后一個循環(huán)后，反應在72℃維持10-30分鐘．使引物延伸完全，并使單鏈產(chǎn)物退火成雙鏈。

臨床應用

移植配型：

伴隨著PCR技術的出現(xiàn)，HLA配型領域也引入了分子生物學技術，通過PCR擴增儀能夠使得HLA基因分型方法快速、準確的建立，使臨床移植配型得到滿足。

診斷惡性腫瘤：

PCR技術不僅帶來了簡便快速、準確的臨床診斷方法，而且提供了腫瘤相關疾病的ZL與預后的監(jiān)控手段。其被用來檢測腫瘤相關病毒基因以及癌基因和抑癌基因缺失與點突變。

診斷遺傳性疾?。?/span>

遺傳性疾病是以核酸的表達產(chǎn)物和核酸分子結構變異為發(fā)病基礎的。對于這一類疾病，PCR技術正好是有效的檢測手段。

診斷感染性疾?。?/span>

在感染性疾病的診斷方面，對于一些沒有可靠和穩(wěn)定的檢測手段以及需要很長周期培養(yǎng)的病原體，PCR技術特別適合使用。