透射電鏡即透射電子顯微鏡(簡(jiǎn)稱TEM),通常稱作電子顯微鏡或電鏡(EM),是使用Z為廣泛的一類電鏡。已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等各個(gè)研究領(lǐng)域,成為組織學(xué)、病理學(xué)、解剖學(xué)以及臨床病理診斷的重要工具之一。
透射電鏡是一種把經(jīng)加速和聚集的電子束透射到非常薄的樣品上,電子與樣品中的原子碰撞而改變方向,從而產(chǎn)生立體角散射。散射角的大小與樣品的密度、厚度等相關(guān),因此可以形成明暗不同的影像,影像在放大、聚焦后在成像器件(如熒光屏,膠片以及感光耦合組件)上顯示出來(lái)的顯微鏡。

在光學(xué)顯微鏡下無(wú)法看清小于0.2微米的細(xì)微結(jié)構(gòu),這些結(jié)構(gòu)稱為亞顯微結(jié)構(gòu)或超細(xì)結(jié)構(gòu)。要想看清這些結(jié)構(gòu),就必須選擇波長(zhǎng)更短的光源,以提高顯微鏡的分辨率。1932年Ruska發(fā)明了以電子束為光源的透射電子顯微鏡,電子束的波長(zhǎng)比可見(jiàn)光和紫外光短得多,并且電子束的波長(zhǎng)與發(fā)射電子束的電壓平方根成反比,也就是說(shuō)電壓越高波長(zhǎng)越短。目前透射電鏡分辨力可達(dá)0.2納米。
按照加速電壓分類:
透射電鏡按照加速電壓可分為低壓透射電鏡、高壓透射電鏡和超高壓透射電鏡。加速電壓在200KV以下的是低壓透射電鏡,在200KV-400KV(包含)之間的是高壓透射電鏡;加速電壓在400KV以上的是超高壓透射電鏡。
1、低壓透射電鏡。Z常用的是100KV電鏡。這種電鏡分辨率高(點(diǎn)0.3nm,晶格0.14nm),但穿透本領(lǐng)小,觀察樣品必須很薄,約為30~100nm,如細(xì)胞和組織的超薄切片、復(fù)型膜和負(fù)染樣品等。相當(dāng)普及。我校有這樣的設(shè)備。
2、高壓透射電鏡。目前常用的是200KV電鏡。這種電鏡對(duì)樣品的穿透本領(lǐng)約為100KV電鏡的1.6倍,可以在觀察較厚樣品時(shí)獲得很好的分辨本領(lǐng),從而可以對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)進(jìn)行三維觀察。
3、超高壓透射電鏡。目前已有500KV、1000KV和3000KV的超高壓透射電鏡。這類電鏡具有穿透本領(lǐng)強(qiáng)、輻射損傷小、可以配備環(huán)境樣品室及進(jìn)行各種動(dòng)態(tài)觀察等優(yōu)點(diǎn),分辨率也已達(dá)到或超過(guò)100KV電鏡的水平。在超高壓電鏡上附加充氣樣品室,使人們可以觀察活細(xì)胞內(nèi)的超微結(jié)構(gòu)動(dòng)態(tài)變化。
按照照明系統(tǒng)分類:
透射電鏡按照照明系統(tǒng)可分為普通透射電鏡和場(chǎng)發(fā)射透射電鏡。
按照成像系統(tǒng)分類:
透射電鏡按照成像系統(tǒng)可分為低分辨透射電鏡和高分辨透射電鏡。
按照記錄方式分類:
常用的透射電鏡按照記錄系統(tǒng)分為攝像型透射電鏡和CCD型透射電鏡。
按照產(chǎn)生電子的方式分類:
常用的透射電鏡按照產(chǎn)生電子的方式分為熱電子發(fā)射型和場(chǎng)發(fā)射型?熱電子發(fā)射型用的燈絲主要有鎢燈絲和六硼化鑭燈絲;場(chǎng)發(fā)射型有熱場(chǎng)發(fā)射和冷場(chǎng)發(fā)射之分?
按照物鏡極靴的不同分類:
常用的透射電鏡按照物鏡極靴的不同分為高傾轉(zhuǎn)?高襯度?高分辨和超高分辨型?

透射電鏡系統(tǒng)由以下幾部分組成:
電子槍:發(fā)射電子。由陰極,柵極和陽(yáng)極組成。陰極管發(fā)射的電子通過(guò)柵極上的小孔形成射線束,經(jīng)陽(yáng)極電壓加速后射向聚光鏡,起到對(duì)電子束加速和加壓的作用。
聚光鏡:將電子束聚集得到平行光源。
樣品桿:裝載需觀察的樣品。
物鏡:聚焦成像,一次放大。
中間鏡:二次放大,并控制成像模式(圖像模式或者電子衍射模式)。
投影鏡:三次放大。
熒光屏:將電子信號(hào)轉(zhuǎn)化為可見(jiàn)光,供操作者觀察。
CCD相機(jī):電荷耦合元件,將光學(xué)影像轉(zhuǎn)化為數(shù)字信號(hào)。
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