體視顯微鏡又可稱為立體顯微鏡，或稱作為解剖顯微鏡，是一種具有正象立體感地目視儀器。體視顯微鏡在生物、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域廣泛用于切片操作和顯微外科手術(shù);在工業(yè)中用于微小零件和集成電路的觀測、裝配、檢查等工作。

體視顯微鏡的原理

　　體視顯微鏡光學(xué)結(jié)構(gòu)原理是：由一個共用的初級物鏡，對物體成像后的兩個光束被兩組中間物鏡亦稱變焦鏡分開，并組成一定的角度稱為體視角一般為12度~15度，再經(jīng)各自的目鏡成像，它的倍率變化是由改變中間鏡組之間的距離而獲得，利用雙通道光路，雙目鏡筒中的左右兩光束不是平行，而是具有一定的夾角，為左右兩眼提供一個具有立體感的圖像。體視顯微鏡實質(zhì)上是兩個單鏡筒顯微鏡并列放置，兩個鏡筒的光軸構(gòu)成相當(dāng)于人們用雙目觀察一個物體時所形成的視角，以此形成三維空間的立體視覺圖像。

體視顯微鏡的作用

　　體視顯微鏡大體分為兩類，每種各有優(yōu)劣。以前的體視顯微鏡系統(tǒng)，即Greenough發(fā)明的光路，利用2物鏡，分別走2條光路，進(jìn)入2個目鏡分別成像。Z近的系統(tǒng)即CMO，利用1個大的物鏡，按一定角度分為2條光路，進(jìn)入2個目鏡成像。兩類體視顯微鏡都可以改變放大倍數(shù)，連續(xù)變倍。

　　一、體視顯微鏡的放大作用

　　體視顯微鏡放大倍數(shù)=物鏡×目鏡×中間變倍×附件透鏡倍數(shù)。

　　中間部分有時設(shè)計成滑塊或轉(zhuǎn)盤式的物鏡轉(zhuǎn)換器，便于轉(zhuǎn)換物鏡倍數(shù)。這在過去的體視顯微鏡中很流行，現(xiàn)在不多見了。Zgao質(zhì)量的體視顯微鏡是安裝了中間變倍透鏡組的，用于改變放大倍數(shù)。

　　早期體視顯微鏡只能放大7x-30x，現(xiàn)在學(xué)生用的體視顯微鏡也能放大2x-70x了。中間變倍的體視顯微鏡可放大250x-400x，更高端的研究級體視顯微鏡可超過500x。工作距離從20-140mm，增加特殊的附加透鏡，可達(dá)到300mm或更大。附加透鏡可接在特殊設(shè)計的物鏡口上，用于改變放大倍數(shù)和工作距離。

　　現(xiàn)代體視顯微鏡配備寬視野、高眼點目鏡，放大倍數(shù)5x-30x。常在目鏡上配膠皮眼罩，避免觀察者的眼鏡直接接觸到目鏡。屈光度可調(diào)，瞳距55-75mm。視場由物鏡倍數(shù)和目鏡的視場光闌尺寸決定。FN即目鏡的視場光闌直徑，在出廠的時候已經(jīng)固定，所以視場與物鏡倍數(shù)相關(guān)。增加物鏡倍數(shù)，視場變小;相反，減小物鏡倍數(shù)，視場變大。例如使用10x目鏡，低倍物鏡(0.5x)時，視場范圍約為65-80mm(取決于中間變倍)，比復(fù)式顯微鏡的視場范圍更大(使用相同目鏡、物鏡時，視場范圍約40mm)。但大的視野要求更高的照明亮度，也往往難以使整個視野均勻照明。

　　二、體視顯微鏡的分辨率和景深

　　與其他光學(xué)顯微鏡一樣，體視顯微鏡的分辨率(D)取決于照明的波長和物鏡的數(shù)值孔徑。

　　分辨率(D)=0.61×λ/(n×sinθ)

　　其中d為Z小分辨距離，λ為照明波長，n為物鏡和樣品間的物質(zhì)折射率，θ物鏡孔徑角的一半。

　　改變目鏡倍數(shù)并不會改變分辨率，只能改變放大倍數(shù)，卻不會增加觀察到的樣品細(xì)節(jié)。所以高倍目鏡(放大倍數(shù)30x或更高)只是空放大。為了對比顯微鏡之間的差別，分辨率常用每毫米的線數(shù)(lp/mm)表示。

　　體視顯微鏡附加透鏡放大倍數(shù)為0.3x-2x，可以改變工作距離和分辨率。通常，分辨率與附件透鏡的放大倍數(shù)成正比;視場范圍與放大倍數(shù)成反比;景深與放大倍數(shù)成反比;工作距離與放大倍數(shù)相反，但不成線性比率關(guān)系。另外，使用附件透鏡，在絕大多數(shù)情況下，對圖像亮度沒有顯著的影響。

　　三、體視顯微鏡的顯微照相術(shù)和數(shù)碼成像

　　Greenough和CMO體視顯微鏡都可以利用傳統(tǒng)的顯微照相術(shù)(膠卷)和數(shù)碼技術(shù)成像。

　　對于各種類型的光學(xué)顯微鏡，觀察時Z重要的因素可能要數(shù)樣品的照明方式了，以及照明對于揭示感興趣特征的效果。體視顯微鏡經(jīng)常利用不同的光源和配置，在反射照明和透射照明系統(tǒng)下檢測樣品，照明方式對于成像具有戰(zhàn)略性的意義。

　　在很多情況下，透射光和反射光照明結(jié)合使用，便于更有效的揭示樣品特性。這篇文章中著重講解反射光照明在鏡檢中的應(yīng)用，包括照明技術(shù)和設(shè)備。用體視顯微鏡檢測的樣品大多都是三維物體，要求操作者使用Z有效的照明，來觀察感興趣部分的細(xì)節(jié)。

　　復(fù)式顯微鏡有DIC、偏光、相差、熒光等觀察方式。而體視顯微鏡由于工作距離更長，數(shù)值孔徑較小，放大倍數(shù)較低，這些觀察技術(shù)很多都不能實現(xiàn)。體視顯微鏡是通過多種照明方式實現(xiàn)的不同觀察。沒有哪種固定的照明策略是Z佳的。根據(jù)不同的樣品，可以有多種機(jī)制，用近乎無限種照明技術(shù)觀察或多種結(jié)合使用。對于一個樣品或物體，盡管有不同的照明方式，但其中某一種可能會得到Z好的觀察結(jié)果。